preventavir

Уреагенифлюоскрин диагностикум инструкция и описание

"УреагениФлюоСкрин"
Диагностикум для выявления антигенов Ureaplasma urealyticum
в реакции иммунофлюоресценции
Диагностики кум "УреагениФлюоСкрин" представляет собой набор для выявления антигенов Ureaplasma urealyticum в реакции иммунофлюоресценции, в который входят 2 комплекта.
В комплект № 1 входят следующие ингредиенты:
антитела поликлональные кроличьи против антигенов Ureaplasma urealyticum, меченые ФИТЦ (АТ-ФИТЦ), лиофилизированные - аморфная масса в виде таблетки синего цвета, гигроскопична;
нормальный кроличий глобулин, меченый ФИТЦ (НКГ-ФИТЦ), лиофилизированный -аморфна масса в виде порошка или таблетки синего цвета, гигроскопична;
растворитель для АТ-ФИТЦ и НКГ-ФИТЦ (ФСБР) - прозрачная бесцветная жидкость
навеска солей для приготовления фосфатно-солевого буфера (ФСБ) - кристаллический порошок белого цвета
фиксирующая жидкость (ФР) - прозрачная бесцветная жидкость
предметные стекла.
В комплект №2 входят:
положительный контроль (К +) - мазок на предметном стекле клеток Vero, инфицированных U. urealyticum (8 серотип)
отрицательный контроль (К) - мазок на предметном стекле клеток Vero, не инфицирован U. urealyticum (8 серотип).
Контрольные препараты др активированы (фиксированные 96 ° этанолом в течение 15 мин). КОМПЛЕКТ № 2 предоставляется по желанию потребителя.
Набор рассчитан на проведение 30 анализов.
НАЗНАЧЕНИЕ
Выявления антигенов U. urealyticum в реакции иммунофлюоресценции в мазках, соскобах, мазках-отпечатках с цервикального канала, уретры и влагалища.
ПРИНЦИП МЕТОДА
АТ-ФИТЦ представляют собой поликлональные кроличьи антитела к цитоплазматических мембран клеток U. urealyticum, меченые ФИТЦ. Принцип действия основан на реакции антиген-антитело. Меченые ФИТЦ антитела против уреаплазм специфически соединяются с антигенами U. urealyticum, которые находятся в фиксированных образцах.
При просмотре препарата в люминесцентном микроскопе определяется зеленая флуоресценция уреаплазм в виде отдельных гранул на мембранах клеток.
ЗАБОР МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Клинический материал из доступных для исследования слизистых оболочек (уретра, цервикс, влагалище) получают с помощью тампонов (хлопковая вата), ложки Фолькмана и других инструментов, наносят тонким слоем в лунки чистого обезжиренного стекла. Препарат подсушивают на воздухе и фиксируют.
Исследуемый материал должен содержать большее количество эпителиальных клеток.
Примечание: дальнейшую обработку препарата рекомендуется проводить сразу же после фиксации. При необходимости допускается кратковременное хранение (2-3 дня при температуре 4 ° С) или длительное (1 месяц при температуре минус 70 ° С) фиксированных препаратов (без повторного замораживания и оттаивания).
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ
1. Лиофилизированные АТ-ФИТЦ растворяют в 1,5 мл ФСБР (рН от 7,2 до 7,6) в течение 3-5 мин. Раствор оставляют на 5-10 мин в обычных условиях (реагенты перед использованием должны иметь комнатную температуру). НКГ-ФИТЦ растворяют аналогично. Растворенные АТ-ФИТЦ и НКГ-ФИТЦ используют в течение 10-12 суток, хранят при температуре от 4 до 6 ° С. При необходимости более длительного хранения (до 1 месяца) АТ-ФИТЦ и НКГ-ФИТЦ разливают на мелкие порции и хранят при температуре минус 20 ° С. Перед использованием реагенты должны иметь комнатную температуру.
2. Навеску солей (ФСБ) растворяют в течение 2-5 мин в 2 л дистиллированной воды при перемешивании при комнатной температуре, хранят при температуре от 4 до 10 ° С не более 7 суток.
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Нанести исследуемый материал в две лунки чистого и обезжиренного предметного стекла. Дать высохнуть на воздухе.
Зафиксировать материал охлажденной ФГ (при температуре от 4 до 10 ° С) в течение 15 мин при комнатной температуре, подсушить на воздухе.
В одну лунку предметного стекла нанести автоматической пипеткой 30 мкл растворенных АТ-ФИТЦ, в другую лунку - 30 мкл растворенного НКГ-ФИТЦ. АТ-ФИТЦ и НКГ-ФИТЦ перед использованием должны иметь комнатную температуру.
Инкубировать препарат 15-20 мин во влажной камере при температуре 38 ± 1 ° С. Не допускается высыхания нанесенных АТ-ФИТЦ на препарате.
Сполоснуть препарат водопроводной водой и промыть фосфатно-солевым буфером (ФСБ) 3 раза по 15 мин для удаления избытка антител. Опять сполоснуть водопроводной водой и дать высохнуть на воздухе.
Исследовать препарат в люминесцентном микроскопе с набором светофильтров: ФС 1-2, БС 8-2, СЗС 7-2, ЖС-18 и при увеличении 600-1000х. При микроскопии использовать специальное нефлюоресциююче масло. При отсутствии последнего возможно использование диметилфталат (х. Ч.).
Примечание: тщательное отмывание препарата необходимо для устранения неспецифического свечения.
УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
При люминесцентной микроскопии уреаплазмы обнаруживаются в виде интенсивного зеленого гранулярного свечение на мембранах эпителиальных клеток и в межклеточном пространстве.
При отсутствии в клиническом материале эпителиальных клеток исследования рекомендуется повторить, чтобы развеять сомнения в правильности взятия материала.
В мазке, окрашенном АТ-ФИТЦ, допускается выявления интенсивного свечения в области мембран не менее на четырех эпителиальных клетках. При ограниченном количестве эпителиальных клеток в клиническом материале положительная оценка предполагает выявление в составе препарата не менее 10 ярко-зеленых гранул, которые четко выделяются на красном фоне препарата. В мазке второй лунки, окрашенном НКГ-ФИТЦ, отрицательный результат проявляется в виде отсутствия специфического свечения в области мембран эпителиальных клеток или наблюдается зеленовато-желтоватая ауто флюоресценция базальных мембран эпителиальных клеток.
Примечание: при оценке препарата обращать внимание на цвет флюоресценции. Уреаплазмы светятся ярко-зеленым цветом. Желтая или зеленовато-желтая флюоресценция оценивается как артефакт. Очень часто источником неспецифического свечения является наличие в исследуемом материале большого количества слизи. Для получения качественных мазков исследуемый материал поместить в пробирку с 5 мл физиологического раствора (ФР), тщательно перемешать и центрифугировать при 1000 об / мин в течение 5-10 мин. Супернатант отбросить, к осадку добавить 50 мкл ФР, суспендировать и приготовить мазки в лунках предметного стекла.
ПРОВЕДЕНИЯ РЕАКЦИИ иммунофлюоресценция НА контрольных препаратов (К + и К-), УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ.
В лунки положительного и отрицательного контрольных препаратов внести по 30 мкл растворенных АТ-ФИТЦ.
Инкубировать препараты 15-20 мин во влажной камере при температуре 38 ± 1 ° С. Не допускать высыхания нанесенных АТ-ФИТЦ.
Сполоснуть препараты водопроводной водой и промыть 3 раза по 15 мин фосфатно-солевым буфером. Опять сполоснуть препарат водой и высушить на воздухе. Исследовать препараты в люминесцентном микроскопе, как указано ранее для исследуемого материала, используя нефлюоресциююче иммерсионное масло.
При правильной постановке реакции в положительном контрольном препарате в 5-10 полях зрения оказывается более 10 ярко-зеленых гранул, связанных с мембранами красновато окрашенных клеток и расположенных между клетками.
В отрицательном контрольном препарате отсутствует ярко-зеленое свечение гранул. Наблюдаются лишь красновато окрашенные клетки Vero без специфического гранулярного свечение.
При получении указанных результатов диагностики кум можно использовать для выявления U. urealyticum.
Форма выпуска
Тест-система включает 2 комплекта:
КОМПЛЕКТ № 1
АТ-ФИТЦ (антитела поликлональные кроличьи против антигенов U. urealyticum, меченые ФИТЦ, лиофилизированные) - 0,15 мл - в одном флаконе, емкостью 10 мл,
закупоренные резиновыми крышечками и завальцованы
алюминиевыми колпачками -1 фл
НКГ-ФИТЦ (нормальный кроличий глобулин, меченый ФИТЦ, лиофилизированный) - 0,15 мл, в той же упаковке - 1 фл
ФСБР (растворитель) - 5,0 мл, в той же упаковке - 1 фл
ФСБ (фосфатно-солевой буфер), навеска солей - 11 г, в той же упаковке - 2 фл
ФГ (фиксирующая жидкость) - 5,0 мл, в той же упаковке - 1 фл
Предметные стекла. -7 шт
Инструкция по применению - 1 шт.
КОМПЛЕКТ № 2
К + - положительный контроль - 1 шт.
К-- отрицательный контроль - 1 шт.
Инструкция по применению - 1 шт.
КОМПЛЕКТ № 2 поставляется по желанию потребителя.
Диагностики кум "УреагениФлюоСкрин" выпускается в виде упакованных в картонные коробки комплектов: комплекты №1 и № 2.
КОМПЛЕКТ № 1 рассчитан на проведение 30-ти определений, включая контрольные образцы.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ
Хранение. Согласно СП 3.3.2.1248-03.
КОМПЛЕКТ № 1 - при температуре от 4 до 10 ° С.
КОМПЛЕКТ № 2 - при температуре минус 20 ° С.
Транспортировки. Согласно СП 3.3.2.1248-03.
КОМПЛЕКТ № 1 - при температуре от 4 до 25 ° С не более 3 суток. Замораживание не допускается.
КОМПЛЕКТ № 2 - при температуре минус 20 ° С.
Срок годности
КОМПЛЕКТ № 1 -1,5 года.
КОМПЛЕКТ № 2 - 1 мес.

Новости медицины:


Резерв лекарств 0 шт.