Алкотест инструкция и описание
Код АТС
VРазличные средства
V04Диагностические препараты
V04CПрочие диагностические препараты
V04CXПрочие диагностические препараты
Допустимая величина содержания алкоголя в биологических жидкостях ЧЕЛОВЕКА
Сыворотка, плазма и цельная кровь - до 0,25 г / л (пороговая норма).
Превышение величины 1 г / л принимается как юридическое доказательство алкогольного опьянения.
Видтворювальнисть (коэффициент вариации) - (5-7)% (в зависимости от диапазона концентраций).
Линейность калибровочной кривой - до концентрации алкоголя 4,5 г / л в исходной пробе (до 45 мкг спирта в фотометрируемых растворе), что соответствует оптической плотности до 1,0 - 1,3.
Приготовление рабочего реагента:
1. "Хромоген". Содержимое флакона 1 поместить в термостойкий стакан или колбу на 0,5 л, добавить 350 мл дистиллированной воды и нагреть смесь до полного растворения. Перед использованием раствор охладить до комнатной температуры.
Хранить раствор в герметически закрытом сосуде при температуре от +8 0 С до +20 0 С в затемненном месте до 2-х недель.
2. "Реагент". В день анализа поместить взболтанных суспензию ферментов с флакона 2 в приведен к комнатной температуры раствор хромогена и смесь хорошо размешать.
Реагент используют в день приготовления.
Проведение анализа:
Длина волны - 450 нм (спекрофотометр или фотоколориметр).
Кюветы 1 см.
Температура инкубации - комнатная (около 20 0 С).
Подготовка проб крови (сыворотки или плазмы).
В небольшие стеклянные пробирки вносят по 0,1 мл проб только взятой крови (для дезинфекции используют водный раствор риванола), добавляют к ним по 0,9 мл разведенного (4%) раствора "осадителя" и встряхивают. Пробы выдерживают при комнатной температуре 5 мин и центрифугируют для осаждения белков при 3000 об / мин в течение 10 мин. Для анализа используют надосадочную жидкость.
Аналогично обрабатывают слепую и калибрувальу пробы.
раствор |
опытная проба |
калибровочная проба |
слепая проба |
4% -ный осадитель, мл |
0,9 |
0,9 |
0,9 |
Кровь (сыворотка или плазма), мл |
0,1 |
- |
- |
Калибровочный раствор этанола (1 г / л), мл |
- |
0,1 |
- |
Вода, мл |
- |
- |
0,1 |
Анализ проводят серийно по 20-30 исследовательских проб с постановкой в ??каждой серии калибровочной и слепой проб по следующей схеме:
раствор |
опытная проба |
калибровочная проба |
слепая проба |
Надосадочная жидкость (подходящая для каждой пробы), мл |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
Рабочий реагент, мл |
3,5 |
3,5 |
3,5 |
Реакцию запускают добавлением рабочего реагента в точно фиксированное время с интервалом, например, в 30 с между пробами.
Останавливают реакцию через 20 мин добавлением ко всем проб по 0,5 мл 0,8 М НСИ в той же временной последовательности, выдерживалась при внесении рабочего реагента.
Пробы фотометрируют при 450 нм против слепой. Реакционная смесь перед добавлением кислоты имеет голубую окраску, которая в кислой среде переходит в желтое.
Расчет концентрации алкоголя (в г / л или промилле 0 / 00 ) в каждой серии проводят по своей калибровочной пробой по формуле:
С = Е д / Е кл
где Е д и Е кл - оптические плотности исследовательской и калибровочной проб соответственно, измеренные против слепой пробы.
2. При определении алкоголя в моче операцию осаждения белков опускают и при анализе используют 0,02 мл мочи, а в калибровочной пробе - 0,02 мл раствора этанола с концентрацией 1 г / л.
Время инкубации - 10 мин. Формула расчета такая же, как приведена выше.
3. Для сыворотки крови (но не цельной крови) допустимо проводить экспресс-анализ и без осаждения белков. Для этого используют 0,02 мл сыворотки, а в калибровочной пробе - 0,02 мл раствора этанола с концентрацией 1 г / л. Время инкубации - 10 мин. Формула расчета не меняется. Погрешность при анализе алкоголя несколько возрастает, однако для экспрессного выявления алкогольного опьянения (С> 1 г / л) такой вариант допустим.
4. При проведении анализа недопустима наличие в лаборатории паров метанола, этанола и других спиртов и летучих окисляющих и восстанавливающих агентов.
5. При наличии в лаборатории фотоэлектроколориметра с уменьшенным объемом фотометрируемых проб (0,5 - 1,0 мл), например, "Мефан-8001", можно пропорционально уменьшить дозу реагентов на всех этапах определения.
6. алкогольоксидазы специфическая как к этанолу, так и метанола (причем последний окисляется в 10 раз эффективнее), поэтому в особых случаях для выявления метилового спирта следует провести газо-жидкостной хроматографии.
Срок хранения
6 месяцев.
Упаковка
По 4 флакона в коробке.